转染试剂Lipo3000
产品货号:TR002
存储条件:2-4℃保存1年。(避免冷冻)
产品说明
LABLEAD Lipo3000试剂采用了脂质纳米颗粒(Lipid Nanoparticle)LNP递送技术, 利用脂质形成纳米微粒将核酸包裹起来形成核酸脂质纳米粒,实现高转染性和可重复性的实验结果。其可针对广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率,同时提供更高的细胞活力。Lipo3000对大多数细胞毒性低并且性质温和,并且我们优化了转染过程的全部四个步骤,并结合脂质体纳米颗粒(LNP)递送技术,实现了较高的转染性能并可以降低所需的试剂量,同时尽可能降低对细胞系产生毒性的风险。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。
产品特点:
1) 卓yue的转染效率—针对较难转染细胞,可将效率提升2~10倍
2) 作用温和,细胞毒性低—可改善细胞活力
3) 高性价比高,同时实现更好的转染结果
使用方法
DNA的转染
对大多数细胞来说,转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性。
1.接种细胞至70-90%汇合度时转染。
2.按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂(建议同时用2管),充分混匀
3.使用Opti-MEM培养基稀释DNA,制备DNA预混液,然后添加Lipo3000-A 试剂,充分混匀。
4.在每管已稀释的Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例)。
5.室温孵育5分钟。
6.加入DNA-脂质体复合物至细胞中。
7.37℃孵育细胞2-4天。然后分析转染细胞。
siRNA转染
转染siRNA至细胞中时,遵循如上所述的DNA实验方案,但在稀释siRNA时不要加入Lipo3000-A试剂(第3步)。
细胞培养容器 |
|
96-well |
24-well |
6-well |
贴壁细胞 |
|
1~4×104 |
0.5~2×105 |
0.25~1×106 |
Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂(建议同时用2管) |
Opti-MEM培养基 |
5ul×2 |
25ul×2 |
125ul×2 |
Lipo3000-B |
0.15和0.3ul |
0.75和1.5ul |
3.75和7.5ul |
|
Opti-MEM培养基稀释DNA,制备DNA预混液,然后添加Lipo3000-A试剂,充分混匀 |
Opti-MEM培养基 |
10uL |
50ul |
250ul |
DNA (0.5–5 ug/ul) |
0.2ug |
1ug |
5ug |
|
Lipo3000-A试剂(2 ul/ug DNA) |
0.4ul |
2ul |
10ul |
|
Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例) |
稀释的DNA |
5ul |
25ul |
125ul |
稀释的Lipo3000-B |
5ul |
25ul |
125ul |
|
室温孵育5分钟 |
||||
加入DNA-脂质体复合物至细胞中 |
|
96-well |
24-well |
6-well |
DNA-脂质体复合物 |
10uL |
50ul |
250ul |
|
37°C孵育细胞2–4天。然后分析转染细胞。 |
特别提醒:
本公司所有产品仅供专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅。
更多详情:
http://www.lablead.com.cn/SonList-2379531.html
https://www.chem17.com/st534943/product_37152544.html